Кислотоупорные сапрофиты

Наиболее специфичны в реакции преципитации в геле антигены из разрушенных микобактерий. Для дезинтеграции может быть использован ультразвук (Тогунова с соавторами, 1959). Следует учитывать, что при этом обрабатываемая суспензия должна охлаждаться для сохранения термолабильных антигенов, и в то же время Удельная мощность должна быть не ниже 10 вт/см2. Может быть применен н другой способ приготовления антигенов, называемый сырыми экстрактами (по А. И. Тогуновой и В. М. Должанскому). геном. При необходимости быстрого приготовления небольших количеств антигена можно пользоваться экспресс-методом. Культуру в количестве 0,5-2 г растирают в ступке с битым стеклом или песком в течение 20- 40 минут. Обязателен микроскопический контроль сырых экстрактов: при окраске препаратов по Цилю-Нильсену виден синий детрит, могут сохраняться и единичные кислотоупорные палочки. Реакция преципитации протекает в геле (агаре). Готовят 1% агар из сухого препарата фирмы Дифко с 1,6% NaCl, автоклавируют при 110°, после чего консервируют антисептиком (лучше мертиолитом в конечной концентрации 1 : 10 000). Для постановки реакции диффузионной преципитации агар разливают тонким (2 мм) слоем в стерильные чашки Петри. После того как агар застынет, на его поверхности размещают стерильные металлические цилиндрики и в промежутки между цилиндриками наливают новый слой агара толщиной около 3 мм. Обычно один цилиндрик помещают в центре, а остальные — по окружности. Количество цилиндриков определяется либо числом испытуемых антигенов, либо числом преципитирующих сывороток. Расстояние между цилиндриками должно составлять примерно 15 мм. Когда агар застынет, цилиндрики осторожно вынимают пинцетом.

Автор: admin1